本标准化文件由解放军总医院丛玉隆教授起草,三次召开全国尿液分析专家研讨会征求了对文件的意见,特别感谢朱忠勇、金大鸣、陈宏础、顾可梁等老前辈多次亲笔修改,经5 次易稿,使内容不断完善。最后经中华医学检验分会“血液学和体液学专家委员会”广州召开的全体委员会上一致通过,并经检验学会常委会讨论决定,建议全国检验界参考此文件规范实验室的操作。
尿液沉渣检查是尿液分析的重要的组成部分,对临床诊断、治疗监测及健康普查具有重要意义。针对目前国内临床检验的现状,参考相关文献,我们对尿液沉渣检查标准化提出如下建议。
材料与器械
一、收集标本的容器
1. 收集和运送尿液的容器应由不与尿液成分发生反应的惰性材料制成,洁净、防漏、防渗,一次性使用;容积应> 50ml ,圆形开口的直径> 4. 0 cm ,具有较宽的底部。尽可能使用具有安全、易于开启的密封装置,以保证标本运送安全。
2. 用于离心尿液的离心管,应具备以下条件,清洁、透明、带刻度,刻度上应至少标明10 ml 、1 ml 、0. 2 ml ,容积应>12 ml ,试管底部呈锥形或缩窄形。试管口尽可能具有密封装置。最好使用不易破碎的一次性塑料或玻璃离心管。
3. 用于尿沉渣分析的容器、离心管、玻片必须能进行标记,便于病人标本的识别,且应保持洁净。
二、尿沉渣计数板
尿沉渣的量和压(涂) 片厚度是标准化重要环节,在普通玻片上随意滴加沉渣液或加盖玻片(甚至不加盖玻片) ,不能提供标准化的结果。建议使用标准化的沉渣计数板。
三、离心机
采用水平式离心机,离心时应盖上盖,以保证安全。离心时,机内温度应尽可能保持< 25 ℃,离心机相对离心力(RCF) 应在400 ×g 左右。离心机转速与相对离心力的换算公式为:
g = 11. 18 ×(rpm/ 1 000) 2 ×R 或 rpm = 1 000 ×[400/ (11. 18 ×半径) ]1/ 2
注:rpm为每分钟转数 R 为半径,指从离心机轴中央到离心管底部的距离
g 为相对离心力
例如:
水平离心机半径为20 cm 时,采用1 338 r/ min(或1 350r/ min)
水平离心机半径为16 cm 时,采用1 495 r/ min(或1 500r/ min)
水平离心机半径为10 cm 时,采用1 892 r/ min(或1 900r/ min)
四、显微镜
尿沉渣检查尽可能使用具有内置光源的显微镜,光线强度可调,应具备40 倍、10 倍的物镜和10 倍的目镜。同一实验室如有多台显微镜,各显微镜的物镜及目镜的放大倍数应一致。
五、自动化设备
有条件的实验室也可使用各类自动、半自动的尿沉渣分析仪作为尿沉渣分析,或用作过筛,但此类仪器必须经权威机构认可。
六、计算机数据处理系统
在有条件的单位,可使用带计算机成像系统的显微镜、标准化的沉渣检测系统和相关辅助软件来自动处理结果,但检查方法和尿沉渣结果报告方式须标准化。
标本的收集及运送
一、标本的收集
实验室工作人员、医生、护士必须对病人留尿进行指导、务必使尿道口保持清洁。随机尿液标本的留取无特殊时间规定,但病人必须有足够的尿量(30～50 ml) ;晨尿指病人起床后第一次尿;收集“时段尿”时,应告知病人时间段的起点和终点,起始时先排空膀胱;三杯试验留尿时间要分段明确,做好标记。送检单上应注明留尿时间、送检时间。
二、标本的运送
按上述要求留取尿液应在2 h 内完成检验,如果标本收集后2 h 内无法完成分析,可2～8 ℃冷藏,6 h 内完成检验;如仅做尿沉渣检查,可在尿标本中加适量防腐剂(大多使用400 g/ L 的甲醛溶液,每升尿液加入5 ml 。应注意甲醛过量时可与尿素产生沉淀物,干扰显微镜检查) 。
三、标本的标记
标本容器必须有标记,包括:病人姓名、特定编码(或住院病人的病区、床号) 、标本收集时间。标签应贴在容器上,不可贴在盖上。
四、标本的接收
实验室应建立严格的标本接收制度,工作人员在接收标本时,必须检查标本容器是否符合要求,标记内容与医生所填写化验单是否一致;从留尿到接收标本的时间是否过长;标本是否被污染。尿标本量不少于30 ml ,在特殊病例不可能达到此要求时(如小儿、烧伤、肾衰无尿期) ,应在检验报告单上注明收到的尿量、检查方法(离心或未离心) 。
尿沉渣检验的操作步骤
一、离心
离心管中倒入充分混匀的尿液至10 ml 刻度处, RCF400 ×g ,离心5 min。离心后倾倒或吸去上清液,离心管底部残留尿液的量应在0. 2 ml 处,使之浓缩50 倍。
二、镜检
沉渣液混匀后,取1 滴(约15～20μl) 充液到标准尿沉渣计数板里(按说明书操作) ,先用低倍镜观察,后用高倍镜。计数细胞或管型,按××/μl 报告。尿结晶、细菌、真菌、寄生虫等以+ 、+ + 、+ + + 、+ + + + 或1 + 、2 + 、3 + 、4 + 形式报告。
尿结晶、盐类的报告方法
尿结晶
1 + :1～4 个/ 每高倍视野
2 + :1～4 个/ 每高倍视野
3 + :1～4 个/ 每高倍视野
原虫、寄生虫卵的报告方法:
1 + :1 个/ 每视野～4 个/ 每高倍视野
2 + :5～9 个/ 每高倍视野
3 + :10 个/ 每高倍视野
细菌、真菌的报告方法:
±:数个视野散在可见
1 + :各个视野均可见
2 + :数量多或呈团状集聚
3 + :无数
盐类
- :无
1 + :少量
2 + :中等量
3 + :多量
三、尿沉渣的检查内容
应包括: (1) 细胞:红细胞、白细胞、吞噬细胞、上皮细胞(肾小管上皮细胞、移行上皮细胞、鳞状上皮细胞) 、异形细胞等。(2) 管型:透明管型、细胞管型、颗粒管型、蜡样管型、脂肪管型、混合管型、宽形管型等。(3) 结晶:磷酸盐、草酸钙、尿酸结晶和药物结晶等。(4) 细菌、寄生虫(或卵) 、真菌、精子、粘液等。(5) 临床医生特殊要求的其他成分。四、有条件的实验室应开展各种尿液有形成分的染色检查,配置多种类型显微镜(如相差显微镜、偏振光显微镜等) ,以便于有形成分的进一步鉴别。
尿液沉渣检查仅为尿液分析的一部分,应结合尿液理学,化学检查及临床资料综合分析,再发出报告。尿沉渣应建立质量保证体系,同时应进行尿沉渣检查的专业培训,技术未达到熟练程度要求者,不得上岗。
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